欢迎来到Bioswamp武汉贝茵莱生物科技有限公司   注册   登录

ELISA的双抗体夹心法

 ELISA指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  

⑴将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。

⑵加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。

⑶加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。

⑷加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

 根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。