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技术文章

  • ELISA样本制备指南及注意事项

    定义及介绍        ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附测定)是最基础的免疫学实验之一,其理论基础是抗原抗体的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本,实验操作步骤并不繁琐,但实验完成后需要把样...

    2021-09-07 swamp 234

  • 导致ELISA实验假阳性的5大因素

    ELISA法对IgG、IgM都有很好的检测能力,因其灵敏度高,价格低廉,操作方便,结果客观,在国内实验室广泛应用,但在工作中遇到的最大的问题是出现假阳性的问题。影响因素除了方法学、试剂盒本身之外,还有标本处理、操作不当等多种因素,双试剂两组结果进行配对t检验,差异(P>0.05)均无统计学意义。多种因素可能会导致ELISA法本底偏高。出现灰值,除了严格操作、做好质控外,对可疑假阳性的标本一定...

    2020-06-09 swamp 685

  • 【实验小Tips】ELISA实验要点:洗涤是关键

     优化ELISA的重点之一在于洗涤。洗涤步骤可降低未结合抗体所引起的背景信号,从而增加分析的信噪比。每一步之间的洗涤确保只有特异的结合事件被保留,在最后一步产生信号。而不充分的洗涤会导致差异和高背景,从而带来不理想的结果。             接下来将为你介绍一些利用自动洗板机来洗涤ELISA平...

    2020-06-09 swamp 647

  • ELISA实验过程中操作因素对结果的影响

    ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较大的误差。ELISA测定一般遵循以下步骤:固相包被→加样品→温育→洗涤→加酶结合物→温育→洗涤→加底物→温育→显色→终止显色→比色。以下叙述各个步骤中的影响因素。1.加样加样器是一种比较精密的工具,其在长时间使用时会因机械磨损或者推动杆内附着血痂等原因造成加样不准,尤其是对于样本量较大的临床实验室,因此必须定期对加液器进行维护和校准。每次加不同的标本时均需更...

    2020-06-09 swamp 585

  • 关于抗体的单克隆抗体

    (monoclonal antibody,McAb)克隆选择学说:淋巴细胞在与抗原接触前就已经存在多种多样的与抗原专一性结合的受体,一种细胞带一种受体,进入机体的抗原选择性的结合其中的个别淋巴细胞,使之活化,增殖产生大量带有同样受体的细胞群,分泌同样的抗体。当抗原进入体内,在机体中就会诱导出针对不同抗原决定簇的多种抗体,如果要把这些抗体一一分开,用现有的生物化学或物理化学方法是根本办不到...

    2018-12-17 swamp 354

  • ELISA Kit:选对,用对,才能事半功倍!

    说到ELISA Kit,相信大家都不会陌生。ELISA Kit的诞生,是为了帮助科研工作者省掉繁琐的实验过程,提高科研效率。如果选对了试剂盒,用对了实验技巧,就会让您的实验效率事半功倍。1      如何选购ELISA Kit市面上任意品牌的一个ELISA Kit售价都在1000元以上如果选错了试剂盒轻则损失一笔科研经费重则毁掉整个实验课题所以选个对的,很有...

    2018-12-17 swamp 874

  • ELISA的采取和保存

    可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在...

    2018-11-02 swamp 228

  • 一步一步教你做PCR

    整天谈论测序,那测序里面关键的一环是什么呢?当然是PCR了。呵呵,本次小编就写给只会做分析而不会做实验的的生物信息小伙伴们。很重要奥,所有的分析最终都要落到验证上奥! 一、实验原理PCR是体外人工选择性扩增DNA的一种方法,它类似于生物体内DNA的复制。在生物体内DNA复制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs;而体外PCR反应同样需要类似的成分,有模板、引物...

    2018-01-24 swamp 487

  • 这些问题才是导致 ELISA 测定结果出错的元凶?

    ELISA 即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和 Perlmann 于 1971 年最先应用该法进行了 IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA 的基本原理是:①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(...

    2017-12-21 swamp 314

  • 蓝蓝绿绿的流式抗体,你会搭配吗?

    一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3 个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。A、根据流式细胞仪搭配流式抗体流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCal...

    2017-12-12 swamp 681

  • 定量蛋白质组学的方法学

    ...

    2017-12-12 swamp 584

  • 关于血清的使用,这四个疑惑是你该清楚了解的!

    1为什么要热灭活血清?有必要做热灭活吗?问&答------------------------------------------- 56℃加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。...

    2017-11-27 swamp 657

  • 我们为什么需要睡眠,缺觉会如何?

    现如今,有很多人都被“睡眠剥夺”虐过:感觉身体被掏空、暴躁易怒、很难集中注意力等等。所以,睡眠对大脑的重要性真的超乎想象。尽管在入睡后大脑似乎“歇菜”了,但是它并不是不工作的。通过脑电活动模式的研究我们可以知道,当你睡着时,大脑在两种模式中转换:快速眼动(REM)睡眠和慢波睡眠。慢波睡眠更多地发生在夜晚,它的特征是大量脑细胞的脑电活动节奏缓慢(每秒产生1至4次)。随着夜越来越深,我们的REM睡眠越...

    2017-11-14 swamp 1248

  • 你的细胞出现不贴壁,生长缓慢等情况了吗?

    在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,这些问题从细胞生长角度来说,针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好,甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因: ●胰蛋白酶消化过度 ;●支原体污染 ;●培养基pH值过碱(NaHCO3分解);               ●细胞老化 ;...

    2017-11-14 swamp 667

  • 9月Cell期刊不得不看的亮点研究

    9月份结束了,9月份Cell期刊又有哪些亮点研究值得学习呢?谷君对此进行了整理,与各位分享。1.两篇Cell揭示藻类如何从空气中吸收二氧化碳,有助解决全球粮食危机doi:10.1016/j.cell.2017.08.044; doi:10.1016/j.cell.2017.08.008图片来自Benjamin Engel/Max Planck Institute of Biochemistry。两...

    2017-10-12 swamp 874

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